山東Systec培養(yǎng)基制備器
配制培養(yǎng)基的原則:控制培養(yǎng)基的條件,控制培養(yǎng)基的pH配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點調(diào)節(jié)pH。各大類微生物要求的適宜生長pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0,細菌為6.5-7.5.放線菌為7.5-8.5.培養(yǎng)基的pH與其C/N有極大關系。C/N高的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)各種的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后其pH明顯下降;相反,C/N低的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)一般細菌的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后,其pH則明顯上升。這是由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗與代謝產(chǎn)物的積累,改變了培養(yǎng)基的pH,若不及時控制,將導致菌體生長停止。制備培養(yǎng)基的操作要點:易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。山東Systec培養(yǎng)基制備器
液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對應詞,是微生物或動植物細胞的液狀培養(yǎng)基。它具有進行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點。在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細胞生長,提高生產(chǎn)量。培養(yǎng)基的配制:配料:配方換算→在容器中加入少量水→按照配方稱取各種藥品,依次加入→加足所需水量一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或的1NNaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進行過濾。大容量 培養(yǎng)基制備器售后一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形。
簡單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基成分,介質(zhì)中使用的化學物質(zhì)應該是化學純品,銅鍋或鐵鍋易導致銅、鐵混入培養(yǎng)基,使細菌難以繁殖。用不銹鋼鍋加熱溶解較為適宜。溶解于水的鍋子,可用溫水加熱,隨時攪拌,防止結焦。若發(fā)現(xiàn)結焦,則不能使用介質(zhì),需重新調(diào)配。在溶解大多數(shù)固體成分之后,用少量熱將其全部溶解,直到沸騰。簡單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基的pH值,由于加熱消毒過程中培養(yǎng)基的pH值會發(fā)生變化,因此應在培養(yǎng)基組分完全溶解后,調(diào)整pH值。舉例來說,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而腸浸出物的pH值則明顯上升。所以,在這一步中,操作者要注重不斷探索經(jīng)驗,掌握培養(yǎng)基的很終pH值,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。在調(diào)整pH值后,要將其煮沸幾分鐘,以利于培養(yǎng)基沉淀。
培養(yǎng)基配制方法:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗的較基礎步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎成分制備培養(yǎng)基時,應按照配方準確配制,并記錄相關信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。培養(yǎng)基制備器是一類化學成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學成分的化學藥品配制而成。
實驗室在制作培養(yǎng)基時候的經(jīng)驗總結:培養(yǎng)基分裝:培養(yǎng)基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當。分裝容器應預先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。山東Systec培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應由簡單的無機物組成。山東Systec培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的使用:1.瓊脂培養(yǎng)基的融化:將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發(fā)生破裂。融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基,應根據(jù)相關標準,縮短融化后放置的時間。山東Systec培養(yǎng)基制備器
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